پایان نامه کارشناسی ارشد  

 گرایش : غیرزیستی

استخراج و شناسایی ترکیبات طبیعی موجود در کبد و بافت عضله ماهی کفشک زبان گاوی (Largescale tonguesole)

*همراه با مقاله بررسی و شناسایی برخی از ترکیبات طبیعی و اسیدهای چرب موجود در روغن کبد و عضله ماهی کفشک زبان گاوی (largescale tonguesole) در 13 صفحه

چکیده :

در این تحقیق مواد طبیعی و اسید های چرب موجود در بافت کبد و عضله ماهی کفشک زبان largescale tonguesole با نام علمی  (Cynoglossus Macrolepidotus ) معروف به زبان گاوی با استفاده از روش(Bligh And Dyer ) استخراج گردید .

برای شناسایی این مواد ابتدا کلروفرم که به عنوان حلال مورد استفاده قرار گرفته بود توسط دستگاه Rotary Evaporator تبخیر و سپس مواد در –n هگزان حل گردید و به دستگاه GC-MS تزریق شد . با استفاده از کروماتوگرام جرمی و طیف های جرمی بدست آمده مواد طبیعی موجود از جمله اسیدهای چرب بافت کبد و عضله با محاسبه اندیس کواتس و مقایسه آنها با اندیس کواتس استاندارد و نیز بررسی داده های طیفی ( GC-MS ) و مقایسه آنها با داده های استاندارد موجود در مراجع (Eight Peak ) شناسایی گردید .

در کبد یازده ترکیب شناسایی شد که  Palmitic Acid با 98/14 درصد بیشترین مقدار می باشد . سایر ترکیبات شناسایی شده در کبد شامل Oleic Acid (30/12درصد) ،

 1,3-Cyclooctadiene(97/7درصد)stearicAcidو(80/6)درصد، methyl eicosa-5,8,11,14,17 pentaenoate   (45/6 درصد) ،  1,4,8-Dodecatiene (75/5 درصد). 9-Hexadecanoic Acid (39/5درصد)ethyl ester، 5,8,11,14-Eicosatetranenoic Acid (08/4درصد)،Heptacosane (77/1درصد)،3-Heptadecan-5-yne (24/1درصد)،Myristic Acid (66/0درصد)می باشد . ترکیبات شناسایی شده در بافت عضله شامل Plamitic Acid (15/43درصد) ، Methyl Eicosa-5,8,11,14,17-Pentanoate  (51/23درصد) ،Stearic Acid (35/8درصد)،Oleic Acid(68/0درصد)،Nonane(74/6درصد)، Decane(06/3درصد) می باشد .

واژگان کلیدی :

اسیدهای چرب غیر اشباع

روغن کبد و عضله ماهی

کفشک زبان گاوی

پالمتیک اسید

اولئیک اسید

مقدمه :

اسیدهای چرب اشباع نشده با چند پیوند دو گانه (PUFA)Poly Unsturated Fatty Acids  از نوع اسید های چرب Omega-3 و اسیدهای چرب Omega-6 جزو اسیدهای چرب  ضروری برای بدن انسان هستند که بدن انسان توانایی ساخت این اسیدهای چرب اشباع نشده  را ندارد و باید از طریق مواد غذایی تامین گردد .

 اسیدهای چرب  Omega-3 بیشتر در بدن  ماهی و بخصوص ماهی های  روغنی  مثل شاه  ماهی،ماهی خال مخالی، ساردین ، پلیچارد، ماهی آزاد و ماکرل یافت می شود .

اسیدهای چرب امگا 3 شامل (ALA) Alpha – Linolenic Acid و دو مشتق آن با اسامی Decosahexaenoic Acid (DHA) و  Eicosapentaenoic Acid (EPA)

می باشند .

 در بدن ماهی ALA از طریق فعل و انفعالات بیوشیمیایی به EPA , DHA تبدیل می گردد . مشابه همین امر در بدن انسان نیز رخ می دهد اما آنچه حائز اهمیت است این است که ALA در بدن وجود نداشته و ساخته نمی شود ، بنابراین بایستی از طریق مواد غذایی(مثل ماهی و روغن ماهی که یکی از منابع سرشار اسیدهای چرب امگا 3 است ) به بدن برسد و همین نکته نشانگر ضرورت مصرف ماهی و غذاهای دریایی می باشد . [12] .

 DHA برای عملکرد مغز، چشم و سیستم تولید مثل پستانداران ضروری است و تحقیقات اخیر نشان می دهد که وجود آن به میزان کافی در بدن باعث تعادل خلق و داشتن روحیه مثبت

 می گردد .

EPA برای ساخته شدن پروستاگلایدینهای ضروری برای عملکرد صحیح سیستم قلب و عروق حیاتی هستند و در ساختمان غشای سلولی نیز شرکت می کنند.

فهرست مطالب

عنوان     صفحه

چکیده

مقدمه

فصل اول: کلیات

1-1 هدف

1-2 پیشینه تحقیق

1-3 روش کار و تحقیق

فصل دوم: کفشک زبانی ماهیان(cynoglossidae tongue soles)

                کفشک زبان گاوی(cynoglossus marco lepidotus)

1-2کفشک زبانی ماهیان (cynoglossidae tongue soles)

2-1-1 ریخت شناسی کفشک زبانی ماهیان

2-1-2 گونه های موجود در ایران

2-2 جایگاه سیستماتیک کفشک زبان گاوی (cynoglossidate macrolepidotus )

2-2-1 ریخت شناسی کفشک زبان گاوی (largescale tonguesole)

2-2-2 محیط زیست

2-2-3 ارزش اقتصادی

2-2-4 اندازه و وزن

2-2-5 پراکنش

فصل سوم:چربی ها (lipids) وروغن ماهی(fish oil)

3-1 چربی ها

3-2 اسید های چرب

3-2-1 مشخصات عمومی اسیدهای چرب

3-2-2 خواص اسیدهای چرب

3-3 ساختمان و خواص انوع چربیها

3-3-1 چربی های خنثی (اسیل گلیسرولها)

3-3-2 فسفوگلیسیریدها

3-3-3 اسفنگولیپیدها و گلیکولیپیدها

3-3-4 موم ها ( waxed)

3-3-5 لیپیدهایی که صابون نمی شوند

3-6 روغن ماهی (Fish oil)

فصل چهارم : مواد و روش ها

4-1 مواد مصرف شده

4-2 وسایل آزمایشگاهی مورد نیاز

4-3 دستگاههای مورد نیاز

4-4 روش

4-4-1 تهیه نمونه ماهی کفشک زبان گاوی

4-4-2 استخراج مواد طبیعی از کبد و بافت عضله ماهی کفشک زبان گاوی

4-4-3 مراحل عملی استخراج به روش Bligh and dyer

4-4-4 استخراج و خالص سازی چربی ها در روش Bligh and dyer

4-5 استفاده توأم از کروماتوگراف و طیف سنج جرمیGC/MS

4-5-1 اندیس کواتس (Kovts index )

4-6 شناسایی مواد طبیعی موجود در فاز –n هگزانی کبد و بافت عضله

 ماهی کفشک زبان گاوی (largescale tongusole) با استفاده از دستگاه GC/MS

4-6-1 مشخصات دستگاه GC/MS مورد استفاده

فصل پنجم : نتایج آزمایش و بحث

5-1 نتایج ، تفسیر داده ها و شناسایی طیف های GC-MS

5-2 بحث

پیشنهادات 

فهرست منابع فارسی

فهرست منابع انگلیسی

چکیده انگلیسی

فهرست جداول

عنوان                        صفحه

جدول 3-1 برخی از اسیدهای چرب طبیعی

جدول 5-1 ترکیبات شناسایی شده در فاز کلروفرمی کبد ماهی کفشک زبان گاوی

جدول 5-2 نتیجه گیری کلی در مورد ترکیبات شناسایی شده در کبد ماهی کفشک زبان گاوی

جدول 5-3 ترکیبات طبیعی شناسایی شده در فاز کلروفرمی بافت عضله ماهی کفشک  زبان گاوی

جدول 5-4 نتیجه گیری کلی در مورد ترکیبات شناسایی شده در بافت عضله ماهی  کفشک زبان گاوی

فهرست شکل ها

عنوان                            صفحه

شکل 2-1 کفشک زبان گاویlargescale tonuesole))                                                     18

شکل 2-2 نمای سر ماهی کفشک زبان گاوی                                                                    20

شکل 2-3 نمای پشت بدن ماهی کفشک زبان گاوی                                                 20

شکل 2-4 نمای دم ماهی کفشک زبان گاوی(largescale tanguesole) )                    20

شکل 2-5 پراکنش ماهی کفشک زبان گاوی                                                                      21

شکل 3-1 ساختار مولکولی (ALA) Alpha linolenic acid .                                                33

شکل 4-1 نمونه ماهی کفشک زبان گاوی                                                                        37

شکل 4-2 نمونه کبد ماهی کفشک زبان گاوی                                                                   37

شکل 4-3 نمونه عضله ماهی کفشک زبان گاوی                                                    38

شکل 4-4 دستگاه Rotary evaporator                                                                       39

شکل 4-5                                                                                                                        41

شکل4-6 شمای کلی از یک سیستم GC/MS                                                                    43

شکل 4-7 نحوه محاسبه اندیس کواتس از روی زمان بارداری                                               45

فهرست نمودار

عنوان                                       صفحه

نمودار 5-1 کروماتوگرام  GC-MS مربوط به فاز کلروفرمی کبدها ماهی  کفشک زبان گاوی                                                                                              

نمودار 5-2 کروماتوگرام GC-MS مربوط به فاز کلروفرمی عضله کفشک  زبان گاوی